Oxobis(pentane-2,4-dionato-O,O')vanadium

Endpoint summary

Key value for chemical safety assessment

Genetic toxicity in vitro

Description of key information

Compte-tenu de sa solubilité dans l’eau d’environ 9.0 g/L, la substance à enregistrer: acétylacétonate de Vanadyle (substance cible) se dissocie presque entièrement en espèces chargées (les deux substances sources): les anions organiques d’acétylacétone (aussi appelé 2,4-pentanedione) et les cations métalliques de Vanadium tetravalent (V4+). La méthode d’évaluation de la génotoxicité in vitro de la substance à enregistrer peut donc être basée sur une approche par références croisées (« Read across »), en considérant la génotoxicité de la partie organique et de la partie inorganique séparément dans un premier temps, et en conjonction par la suite pour l’évaluation finale. 

 

Les données existante sur la mutagénicité bactérienne (Test de Ames) de la partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n’indique aucune propriétés mutagènes (Ballantyne & Cawley, 2001 et Gava et al., 1989). Les données existante sur la mutagénicité chez des gènes de mammifères de la partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n’indique aucune propriétés mutagènes, (Test CHO sur le gène HGPRT issus d’ovaires de hamster chinois, Vergnes & Ballantyne 2000). Les données existante sur la capacité à induire des dommages à l’ADN in vitro de la partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n’indique aucune propriétés génotoxiques (Tests avec Bacillus subtilus, Matsui et al., 1999).

Une synthèse des données existantes sur les propriétés génotoxiques de la partie inorganique (Vandium tetravalent) est présentée dans le rapport de Costigan et al., 2001 et indique globalement que le Vanadium tetravalent n'est pas génotoxique ou mutagène.

Les observations suivantes ont été notées:

- Pour les procaryotes aucune étude sur les propriétés génotoxiques du Vanadium tetravalent n'est disponible

- Pour les eucaryotes in vitro:

- pas de différence dans l'incidence des abbérations chromosomales n'a été observée dans des lymphocytes humains après exposition à du vanadyl sulfate (Migliore et al., 1993)

- augmentation des abbérations chromosomales dans des cellules ovariennes de hamster après exposition à du vanadyl sulfate ( Owusu-Yaw et al. 1990)

- Du Vanadium tetravalent (sulfate de vanadyl) n'a pas de convertants ni de révertants dans la souche D7 de S. cerevisiae à des doses de Vanadium tetravalent (sulfate de vanadyl) de 420 à 1000 mmol/L en présence et absence d'activation métabolique (Galli et al., 1991). De plus, aucune activité mutagène n’a été détectée chez le hamster dans des cellules V79 à des doses comprises entre 0 et 7,5 mmol / litre en présence et absence d'activation métabolique.

- Pas d'augmentation de l'incidence des transformations chez la souris dans les lignées de fibroblastes C3H10T1 / 2

à des doses allant jusqu’à 5 µg / ml (Doran et al., 1998).

- Résultats négatifs dans un test de transformation de cellules d’embryon de souris BALB / 3T3 à des doses de 5 et 10 μmol / litre (Sabbioni et al., 1993).

- Pour les eucaryotes in vivo (cellules somatiques), Ciranni et al. (1995) ont également étudié la capacité du sulfate de vanadyle d'induire des abberrations chromosomiques et aneuploid

ie dans la moelle osseuse de souris mâles. Une augmentation statistiquement significative du nombre de cellules aberrantes a

été observé a

24 et 36 h. Aucune augmentation de la frequence des cellules poplyploidique n'a ete observee.

 

En conclusion, conformément au CLP (règlement (CE) n ° 1272/2008 du Parlement européen et du Conseil), la partie inorganique de la substance à enregistrer (Vanadium tetravalent) n'est pas considéré comme génotoxique/mutagène pour les cellules germinales. Les deux parties de la substance à enregistrer ne montrant pas de signes de génotoxicité, la substance à enregistrer (Acétylacétonate de Vanadyle) n'est pas classifiée comme génotoxique/mutagène sur les cellules germinales,conformément au CLP (règlement (CE) n ° 1272/2008 du Parlement européen et du Conseil) en tant que mise en œuvre du système UN-GHS dans l'Union Européenne.

Références :

 

Ballantyne B, Cawley TJ (2001).Toxicology update: 2,4-Pentanedione.Journal of Applied Toxicology 21, 165–171.

Costigan M, Cary R, Dobson S (2001). Concise International Chemical Assessment Document 29. Vanadium pentoxide and other inorganic Vanadium compounds. World Health Organisation, Geneva, Switzerland

Doran A, Law F, Allen M, Rushton N (1998) Neoplastic transformation of cells by soluble but not particulate forms of

metals used in orthopaedic implants. Biomaterials, 19:751–759.

Galli A, Vellosi R, Fiorio R, Della Croce C, Del Carratore R, Morichetti E, Giromini L, Rosellini D, Bronzetti G (1991) Genotoxicity of vanadium compounds in yeast and cultured mammalian cells. Teratogenesis, carcinogenesis, mutagenesis,

11:175–183.

Gava C, Perazzolo M, Zentilin L, Levis AG, Corain B, Bombi GG, Palumbo M, Zatta P (1989). Genotoxic Potentiality and DNA-Binding Properties of Acetylacetone, Maltol, and Their Aluminium (III) and Chromium (III) Neutral Complexes. Toxicology and Environmental Chemistry 22: 149-157.

Matsui S. Yamamoto R. Yamada H (1989).The Bacillus subtilis/microsome rec-assay for the detection of DNA damaging substances which may occur in chlorinated and ozonated waters. Water Science and Technology 21: 875-887.

Migliore L, Bocciardi R, Macri C, Lo Jacono F (1993) Cytogenetic damage induced in human lymphocytes by four

vanadium compounds and micronucleus analysis by fluorescence in situ hybridisation with a centromeric probe.

Mutation research, 319:205–213.

Owusu-Yaw J, Cohen M, Fernando S, Wei C (1990) An assessment of the genotoxicity of vanadium. Toxicology letters,

50:327–336.

Roney N, Smith CV, Williams M, Osier M, Paikoff SJ (2005). Toxicological profile for zinc. US Department of Health and Human Services. Public Health Service. Agency for Toxic Substances and Disease Registry. 307 p.

Sabbioni E, Marafante E, Amantini L, Ubertalli L, Birattari C (1978) Similarity in metabolic patterns of different chemical

species of vanadium in the rat. Bioinorganic chemistry, 8:503–515.

 

Vergnes JS, Ballantyne B (2000). In vivo and in vitro genetic toxicology studies with 2,4-pentanedione. Toxic Substances Mechanisms 3: 151-175.

Link to relevant study records

Reference

Reference 1

Endpoint:

in vitro DNA damage and/or repair study

Remarks:

Type de génotoxicité: dommage à l'ADN et/ou réparation

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

key study

Study period:

Jusqu'à 2000

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 479 (Genetic Toxicology: In Vitro Sister Chromatid Exchange Assay in Mammalian Cells)

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

sister chromatid exchange assay in mammalian cells

Specific details on test material used for the study:

- Nom de la substance testée: 2,4-Pentanedione
- Etat physique: liquide
- Stabilité dans les conditions de test: stable

Target gene:

Pas applicable

Species / strain / cell type:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Details on mammalian cell type (if applicable):

CHO-K1-BH4 (subclone D1)

Additional strain / cell type characteristics:

not specified

Metabolic activation:

with and without

Metabolic activation system:

Mélange S9

Test concentrations with justification for top dose:

- Sans le mélange S9 (activation métabolique): 0.02-0.1 mg/ml
- Avec le mélange S9 (activation métabolique): 0.03-0.3 mg/ml

Vehicle / solvent:

Eau

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

not specified

Positive controls:

yes

Positive control substance:

N-dimethylnitrosamine

Remarks:

Avec le mélange S9

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

not specified

Positive controls:

yes

Positive control substance:

ethylmethanesulphonate

Remarks:

Sans le mélange

Details on test system and experimental conditions:

Mode d'application: en milieu

Des cellules CHO cultivées (CHO-K1-BH4, Abraham Hsie, Oak Ridge, TN, USA) ont été traitées en double, à la fois en l'absence et en présence de S9, avec un contrôle négatif (véhicule: eau), un contrôle positif et trois concentrations de 2,4-pentanedione. Les contrôles positifs étaient l'éthylméthane sulfonate (EMS) sans S9 et la diméthyl nitrosamine (DMN) avec S9. Les concentrations testées ont été sélectionnées sur la base d'une étude préliminaire de cytotoxicité. Après un traitement de 5 heures en l'absence de S9 et de 2 heures en présence de S9, du milieu F-12 frais contenant 3 μg / ml de bromodésoxyuridine et additionné de 5% de sérum bovin dialysé a été ajouté, et les cultures ont été incubées pendant 24-28 heures supplémentaires. Après traitement avec de la colchicine (0.5 pg/ml) pendant 2 à 3 heures, les cellules ont été récoltées, fixées et étalées sur des lames de microscope.

Rationale for test conditions:

Non commumiqué

Evaluation criteria:

Augmentation statistiquement significative du nombre de SCE (Sister Chromatid Exchange) par cellule et du nombre moyen de SCE par chromosome

Statistics:

Les données ont été analysées statistiquement après une transformation Box-Cox. Les données pour les groupes d'exposition à la substance et de contrôle négatif ont été comparées en ce qui concerne l'égalité de variance par le test de Levene, l'analyse de la variance (ANOVA) et les tests t. Les tests t ont été utilisés lorsque la valeur F de ANOVA était significative. Lorsque le test de Levene a indiqué des variances similaires et que l'ANOVA était significative, un test t groupé a été utilisé pour les comparaisons par paires. Lorsque le test de Wien Levene a indiqué des variances hétérogènes , tous les groupes ont été comparés par ANOVA pour des variances inégales, suivis si nécessaire d'un test de variance t séparé pour les comparaisons par paires; p <0,05 (bilatéral) a été utilisé comme niveau de signification critique.

Species / strain:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Metabolic activation:

with and without

Genotoxicity:

positive

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

valid

Positive controls validity:

valid

Additional information on results:

Facteurs confondants spécifiques au test:
- Effets du pH: aucun rapporté
- Effets de l'osmolalité: aucun rapporté
- Évaporation du milieu: aucune signalée
- Solubilité dans l'eau: aucune
- Précipitation: aucune signalée
- Autres effets confondants: aucun rapporté

Comparaison avec les données de contrôle historique: oui, conforme pour le contrôle de solvant et positif

Conclusions:

Interprétation des résultats: test positif

Le 2,4-pentanedione est considéré comme génotoxique, en particulier en l'absence de mélange S9.

Executive summary:

La 2,4-pentanedione a été évalué pour son activité génotoxique potentielle en utilisant le test Sister Chromatid Exchange (SCE). Lors d'études préliminaires, il a été montré que des concentrations de 2,4-pentanedione supérieures à 2.0 mg/ml étaient létales pour les cellules CHO (CHO-K1-BH4 (sous-clone D1)) et une concentration de 0.3 mg/ml a induit une diminution de la croissance de 28% environ lors d'un test avec un système d'activation métabolique S9 et une inhibition de la croissance de 38% dans les tests sans mélange S9. Pour l'essai principal, les concentrations maximales choisies étaient de 0.1 et 0.3 mg/ml en l'absence et en présence d'un système d'activation métabolique, respectivement. Les cellules ont été incubées en duplicat avec au moins 5 niveaux de doses et la production des échanges de chromatides sœurs (SCE) a été déterminée pour les trois doses les plus élevées qui n'ont pas produit une inhibition cytotoxique excessive de la division cellulaire. En l'absence de S9-, la 2,4-pentanedione a été directement ajouté au milieu de culture et incubée pendant cinq heures. En présence du mélange S9, les cellules ont été exposés pendant deux heures. De la bromodésoxyuridine (3 μg/ml) était présente dans le milieu de croissance pendant l'exposition. L'activation métabolique s'est faite en utilisant un homogénat de foie S9, préparé à partir de rats mâles Sprague-Dawley induits par Aroclor 1254. Un total de 25 cellules/culture a été examiné pour l'induction de SCE. En tant qu'indicateur de génotoxicité, le nombre de SCE/cellule ainsi que le nombre moyen de SCE/chromosome ont été déterminés. Des contrôles positifs (100 μg d'éthylméthanesulfonate/ml sans mélange S9 et 300 μg de diméthylnitrosamine/ml avec S9-mix), des contrôles négatifs (milieu de culture) et témoins de contrôle (H2O) ont également été inclus.

Une augmentation statistiquement significative du nombre de SCE a été induite après exposition aux trois doses les plus élevées de la substance testée évaluée pour les SCE en l'absence d'un système d'activation métabolique. La dose de 0.1 mg/ml a mené à une augmentation hautement significative de l'incidence des SCE et qui était supérieure à la réponse obtemue avec une concentration comparable de contrôle positif. Le 2,4-pentanedione a donc été considéré comme un agent génotoxique hautement actif dans le test SCE sans activation de S9. En présence de l'activation de S9, une augmentation statistiquement significative des valeurs de SCE a été induite avec les trois doses de 2,4 -pentanedione par rapport aux témoins non traités. L'amplitude de l'augmentation des SCE était inférieure à celle de l'essai sans l'activation de S9 malgré l'utilisation d'une quantité de substance d'essai trois fois supérieure dans cet essai. Les augmentations positives des SCE apparentes dans le test sans l'activation de S9 ont également été induites dans le test avec l'activation de S9. Bien que les relations dose-réponse aient été très fortes dans l'essai sans S9-mix, et absentes dans l'essai avec S9-mix, des augmentations reproductibles et statistiquement significatives ont été détectées dans les deux tests. Le 2,4-pentanedione est donc considéré comme génotoxique, en particulier en l'absence de mélange S9.

Reference 2

Endpoint:

in vitro gene mutation study in bacteria

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

weight of evidence

Study period:

Jusqu'à 2001

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 471 (Bacterial Reverse Mutation Assay)

Deviations:

no

Principles of method if other than guideline:

Test réalisé selon les protocoles standards par inclusion d'un système d'activation métabolique (S9-Mix issu de foies de rats Sprague-Dawley prétraités avec Aroclor 1254).

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

bacterial reverse mutation assay

Specific details on test material used for the study:

- Nom du matériau d'essai: 2,4-Pentanedione
- Etat physique: liquide
- Stabilité dans les conditions d'essai: stable
- Pureté: 99.2%

Target gene:

Pas applicable

Species / strain / cell type:

other: S. typhimurium, TA 98, 100, 1535, 1537, 1538

Additional strain / cell type characteristics:

not applicable

Metabolic activation:

with

Metabolic activation system:

Mélange S9

Test concentrations with justification for top dose:

0.3 -30 mg/plaque (0.3, 1.0, 3.0, 10.0 et 30.0 mg/plaque)

Vehicle / solvent:

Eau

Untreated negative controls:

no

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

other: 4-nitro-o-phenylenediamine

Untreated negative controls:

no

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

sodium azide

Remarks:

TA100 sans S9

Untreated negative controls:

no

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

9-aminoacridine

Remarks:

TA1537 sans S9

Untreated negative controls:

no

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

other: 2-aminoanthracène

Remarks:

Toutes les souches avec S9

Details on test system and experimental conditions:

Mode d'application: en agar (incorporation de plaque)

Durée:
- Durée d'exposition: 24 et 48 h à 37 ° C

Nombre de réplication: 3

Détermination de la cytoxicité:
- Méthode: inhibition de la croissance

Rationale for test conditions:

Non communiqué

Evaluation criteria:

Les substances testéesi qui produisent au moins une multiplication par 2 et proportionnelle à la dose des colonies de mutants par rapport à la valeur de contrôle (solvant) sont considérés comme étant des mutagènes bactériens et des mutagènes suspects de mammifères.

Statistics:

Non communiqué

Species / strain:

other: S. typhimurium T98, 100, 1535, 1537, 1538

Metabolic activation:

with and without

Genotoxicity:

negative

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

not applicable

Positive controls validity:

valid

Additional information on results:

Facteurs confondants spécifiques au test:
- Effets du pH: aucun rapporté
- Effets de l'osmolalité: aucun rapporté
- Évaporation du milieu: aucune signalée
- Solubilité dans l'eau: soluble
- Précipitation: aucune signalée
- Autres effets confondants: aucun rapporté


Étude de définition/de dépistage: oui, en dehors des BPL


Comparaison avec les données de contrôle historique: oui, conforme

Remarks on result:

other: Toutes les souches/types cellulaires testées

Conclusions:

Interprétation des résultats:test négatif

D'après les résultats, il est conclu que la partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n'est pas mutagène dans les conditions du test.

Executive summary:

La 2,4-pentanedione (pure à 99,2%) a été testée pour son activité mutagène potentielle en utilisant le test de mutagénicité bactérienne Salmonella / microsome (test d'Ames).

Le test a été réalisé selon les protocoles standards en incluant un système d'activation métabolique (Mélange S9 issu de foies de rats Sprague-Dawley prétraités avec Aroclor 1254). Dans les essais préliminaires avec la souche TA 100 seulement, une concentration de 97.4 mg/plaque s'est avérée inhiber complètement la croissance bactérienne. La concentration inférieure suivante de 30 mg/plaque a montré des effets toxiques. En conséquence, les doses sélectionnées sur la base de ces essais étaient de 0.3, 1.0, 3.0, 10.0 et 30.0 mg/plaque. Les incubations ont été effectuées en triplicat à 37 °C pendant 24 à 48 heures. Les plaques ont été examinées pour l'état de leurs mates bavtériennes de fond et la croissance a été enregistrée comme confluente (non toxique), clairsemée (modérément toxique) ou absente (toxique). Le solvant de choix étaient l'eau. Des contrôles simultanés de solvant et positifs ont été testés dans chaque test. Les substances utilisés dans les contrôles positifs sans mélange S9 étaient: 0.01 mg 4-nitro-ophénylènediamine/boîte pour TA98 et TA1538, 0.01 mg d'azoture de sodium pour TA100, 0.06 mg de 9-aminoacrididine/boîte pour TA1537 et avec S9-mélange 0.01 mg de 2-aminoanthracène pour toutes les souches.

La 2,4-pentanedione n'a pas produit de doublement selon une courbe dose-réponse du nombre de révertants/plaque dans les souches de Salmonella typhimurium utilisées ni en l'absence, ni en présence du système d'activation métabolique. La sélection des doses a semblé se situer dans une gamme appropriée, car dans les tests avec et sans activation métabolique, la toxicité envers les bactéries a été observée à 30 mg/boîte (dose la plus élevée testée) avec toutes les souches. Des contrôles positifs ont produit des effets mutagènes démontrant la fonctionnalité du système de test. On peut donc conclure que la partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n'est pas mutagène dans les conditions du test.

Reference 3

Endpoint:

in vitro gene mutation study in bacteria

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

weight of evidence

Study period:

Jusqu'à 1989

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 471 (Bacterial Reverse Mutation Assay)

Deviations:

no

Principles of method if other than guideline:

Méthode: autre: selon le protocole initialement décrit par Bruce Ames et al. Les tests de mutagénicité ont été réalisés sur une batterie de souches de S. typhimurium (TA92, T.498, TA100, TA104) selon le protocole initialement décrit par Ames. Le volume total des plaques était de 22 ml, y compris 20 ml de milieu de culture et environ 2 ml d'agar agar.
Les substances testées ont été introduites sous forme de solution aqueuse ou diluées dans du DMSO, en utilisant dans tous les cas un volume de 0.1 ml.
Le nombre de révertants spontanés/plaque était dans les limites suivantes: TA92 (40-70). TA98 (7010), T.4100 (100-160), TA104 (400-700).

Une augmentation de deux fois du nombre de révertants dans les plaques traitées par rapport aux contrôles a été considérée comme une réponse positive significative. Dans chaque essai, de l'eau, du DMSO et du nitrate aqueux de chrome (III) ont été testés comme témoins négatifs. Du dichromate de potassium K2Cr2O7 (10 μg/plaque) et méthylméthanesulfonate (2 μg/plaque) ont été utilisés comme témoins positifs pour les souches TA92 (150-320, 2200-34 000 révertants induits, respectivement), TA100 (200-340, 2100-2300), TA 104 (1050-1 610. 9000-10 000) et de l'hycantone (20 μg/plaque) pour TA98 (150-760). Deux ou trois répétitions par dose testöe ont été utilisées; chaque expérience a été répétée trois fois.

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

bacterial reverse mutation assay

Specific details on test material used for the study:

Non communiqué

Target gene:

Pas applicable

Species / strain / cell type:

other: S. typhimurium souches TA92, TA98, TA100 et TA 104

Details on mammalian cell type (if applicable):

Pas de données

Additional strain / cell type characteristics:

not applicable

Metabolic activation:

without

Metabolic activation system:

Aucun

Test concentrations with justification for top dose:

gamme de doses: 1.9-48 μmol/plaque

Vehicle / solvent:

Le volume total des plaques était de 22 ml, y compris 20 ml de milieu de culture et environ 2 ml d'agar supérieur; il a été rapporté que les substances étaient appliquées sous la forme de solutions aqueuses ou dans du DMSO à un volume final de 0.1 ml. La publication ne précise pas quel solvant a été utilisé pour le 2,4-pentanedione.

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

yes

Positive controls:

yes

Positive control substance:

methylmethanesulfonate

Remarks:

Souches TA92, TA100, TA 104

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

yes

Positive controls:

yes

Positive control substance:

other: Hycantone

Remarks:

Souche TA92

Details on test system and experimental conditions:

Test de Ames

Rationale for test conditions:

Non disponible

Evaluation criteria:

Une réponse mutagène liée à une substance a été considérée comme significative après une augmentation de deux fois (ou plus) du nombre de révertants spontanés dans chacune des souches testées.

Statistics:

Non communiquées

Species / strain:

other: S. Typhimurirum TA92, TA98, TA100

Metabolic activation:

without

Genotoxicity:

negative

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

not specified

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

valid

Positive controls validity:

valid

Species / strain:

other: S. typhimurium TA 104

Metabolic activation:

without

Genotoxicity:

ambiguous

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

not specified

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

valid

Positive controls validity:

valid

Additional information on results:

Non communiqué

Remarks on result:

other: Souches: S. Typhimurium TA92, TA98, TA100

Conclusions:

Interprétation des résultats: ambigu

La partie organique de la substance à enregistrer (2,4-pentanedione) n'a pas montré de réponse mutagène dans les souches de Salmonella typhimurium TA92, TA98 et TA100, respectivement. Dans TA104, les résultats sont ambigus

Executive summary:

La 2,4-pentanedione a été testée pour son activité mutagène potentielle en utilisant le test de mutagénicité bactérienne Salmonella / microsome sans activation métabolique. La 2,4-pentanedione n'a pas montré de réponse mutagène, c'est-à-dire une augmentation d'au moins deux fois du nombre de révertants/plaque par rapport aux témoins non traités dans les souches TA92, TA98 et TA100 de Salmonella typhimurium, respectivement. Avec la souche TA104, le plus grand nombre de révertants/plaque était d'environ 1500. La 2,4-pentanedione a été classé comme «fortement mutagène» avec la souche TA104 dans la gamme de doses examinée (1.9 - 48μmol/plaque). Selon les résultats disponibles, la 2,4-pentanedione a seulement augmenté le nombre de révertants spontanés de la souche TA104 dans la gamme de dose 1.9-10 μmol/plaque. A des concentrations de 10 μmol/plaque et plus, le nombre de révertants déterminés était dans la gamme de contrôle de 400 à 700 révertants/plaque pour cette souche de Salmonella typhimurium particulière. Ainsi, l'augmentation des révertants/plaque ne s'est pas faite selon le principe de dose-réponse. Les résultats de cette étude sont ambigus quant à la mutagénicité de la partie organique de la substance à enregistrer (2,4 -pentanedione).

Reference 4

Endpoint:

in vitro gene mutation study in mammalian cells

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

weight of evidence

Study period:

Jusqu'à 2000

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 476 (In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test)

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

other: Test de mutation de gène de cellules mammaliènnes

Specific details on test material used for the study:

- Nom de la substance testée: 2,4-Pentanedione
- Etat physique: liquide
- Stabilité dans les conditions de test: stable

Target gene:

Locus du gène HGPRT

Species / strain / cell type:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Details on mammalian cell type (if applicable):

CHO-K1-BH4 (subclone D1)

Additional strain / cell type characteristics:

not specified

Metabolic activation:

with and without

Metabolic activation system:

Mélange S9

Test concentrations with justification for top dose:

- 0.005 - 1.5 mg/L pour les tests sans le mélange d'activation métabolique (S9)
- 0.005 - 1.0 mg/L pour les tests avec le mélange d'activation métabolique (S9)

Vehicle / solvent:

Eau

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

yes

Positive controls:

yes

Positive control substance:

ethylmethanesulphonate

Remarks:

Sans mélande d'activation métabolique (S9)

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

yes

Positive controls:

yes

Positive control substance:

N-dimethylnitrosamine

Remarks:

Avec le mélange d'activation métabolique (S9)

Details on test system and experimental conditions:

Les cellules CHO cultivées (CHO-K1-BH4) ont été traitées en double, à la fois en absence et en présence de S9, avec la substance de contrôle du véhicule (eau), une substance témoin positive appropriée et diverses concentrations de la substance testée. La cytotoxicité a été évaluée 18-24 heures après le traitement. Ensuite, 7 à 10 jours après le traitement, les cellules ont été étalées dans du milieu F-12 de Ham contenant de la 6-thioguanine (2.0 µg/ml) et supplémentées à 5% avec du sérum bovin dialyse. La capacité de formation de colonies des cellules au moment de la sélection du mutant a été évaluée en placant 100 cellules/plaque dans chacune des plaques de culture de 4.60 mm contenant le milieu F-12 (sans 6-thioguanine). Toutes les cultures ont été cultivées à 37 ° C dans une atmosphère humidifiée contenant 5% de C02 pendant 6 à 8 jours supplémentaires pour permettre la croissance des colonies. Les colonies ont ensuite été fixées, colorées et comptées. Les concentrations d'essai ont été sélectionnées sur la base d'une étude préliminaire de cytotoxicité.


Mode d'application: en milieu

Rationale for test conditions:

Non communiqué

Evaluation criteria:

Les critères d'une réponse mutagène positive sont des augmentations de la fréquence de mutations statistiquement significatives liées à la dose à deux concentrations consécutives ou plus; une augmentation reproductible statistiquement significative à une ou plusieurs concentrations. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l'aide d'un logiciel statistique BMDP, la valeur de probabilité <= 0,05 (unilatérale) correspond au niveau de signification critique.

Statistics:

Les données ont été analysées par la méthode de Irr et Snee après transformation de Box-Cox.

Species / strain:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Metabolic activation:

with and without

Genotoxicity:

negative

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

not specified

Positive controls validity:

valid

Additional information on results:

Facteurs confondants spécifiques au test:
- Effets du pH: aucun rapporté
- Effets de l'osmolalité: aucun rapporté
- Évaporation du milieu: aucune signalée
- Solubilité dans l'eau: soluble
- Précipitation: aucune signalée
- Autres effets confondants: aucun rapporté


Comparaison avec les données de contrôle historique: oui, conforme pour le contrôle de solvant et positif


Informations complémentaires sur la cytoxicité: des concentrations supérieures à 2.0 mg/ml en présence de S9 et de 3.0 mg/ml en l'absence de S9 ont pratiquement tué toutes les cellules.

Remarks on result:

other: Tous les types cellulaires testés

Conclusions:

Interprétation des résultats: test négatif

La partie organique de la substance à enregistrer 2,4-pentanedione n'était pas considéré comme un mutagène actif dans les conditions du système de test CHO.

Executive summary:

La 2,4-pentanedione a été évalué pour son activité génotoxique potentielle en utilisant le test Mutation de l'ovaire de hamster chinois (CHO) (HGPRT)

Des essais préliminaires ont été réalisés pour déterminer une gamme appropriée de concentration d'essai dans laquelle les concentrations les plus élevées ne tueraient pas plus de (environ) 90% des cellules CHO traitées (CHO-K1-BH4 (sous-clone D1)). Dans ces expériences préliminaires, des concentrations supérieures à 2.0 mg/ml en présence de S9 et 3.0 mg/ml en l'absence de S9 ont pratiquement tué toutes les cellules. Les doses choisies pour le test définitif étaient de 0.005-1.5 mg/ml et de 0.005-1.0 mg/ml en l'absence et en présence du mélange S9, respectivement. Des témoins positifs (éthylèneméthanesulfonate, 200 μg/ml, avec S9, diméthylnitrosamine 200 μg/ml sans S9) et des témoins (H2O) ont également été inclus pour déterminer les effets génotoxiques liés à la 2,4-pentanedione, selon le nombre de mutants/10e6 cellules viables/culture dosée. Toutes les incubations ont été effectuées en duplicat. Les cellules ont été exposées à au moins cinq concentrations qui ont permis une survie cellulaire suffisante pour l'évaluation de la survie et la quantification des mutants. Les cellules ont été exposées pendant 5 h dans des tests avec et sans activation métabolique. La fraction mutante a été déterminée après une période de sous-culture de 9 à 12 jours pour permettre l'expression du phénotype mutant. L'activation métabolique par homogénat de foie S9 a été préparé à partir de rats mâles Sprague-Dawley induits par Aroclor 1254.

La 2,4-pentanedione n'a produit aucune augmentation reproductible ou statistiquement significative de l'incidence des mutations des cellules CHO à des concentrations comprises entre 0.005 et 1.5 mg/ml dans les tests sans système d'activation métabolique S9 ou de 0.005 à 1.0 mg/ml avec le système d'activation métabolique S9. Les cultures aléatoires avec des valeurs mutantes accrues se situaient dans la plage de variabilité typique pour ce test dans le laboratoire testeur et les augmentations ne sont pas apparues comme reproductibles dans les culturesà chaque dose. En conclusion, la 2,4-pentanedione n'est pas considérée comme un mutagène actif dans les conditions du système de test CHO.

Reference 5

Endpoint:

in vitro cytogenicity / chromosome aberration study in mammalian cells

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

key study

Study period:

Jusqu'à 2000

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 473 (In Vitro Mammalian Chromosome Aberration Test)

Deviations:

no

Principles of method if other than guideline:

La 2,4-pentanedione a été évalué pour son activité génotoxique potentielle en utilisant le système de test d'aberration chromosomique in vitro de Ham-ster Ovary (CHO) chinois. Les concentrations testées de 2,4-pentanedione variaient de 0.01 mg/ml à 0.03 mg/ml sans activation métabolique (mélange S9) et de 0.02 mg/
ml à 0.1 mg/ml avec un système d'activation métabolique S9 de foie de rat.

Les gammes de concentration testées ont été choisies sur la base d'un test de cytotoxicité préliminaire et la dose la plus élevée a produit environ 40 à 60% d'inhibition mitotique. Les trois doses les plus élevées qui n'ont pas produit une inhibition cytotoxique excessive des cellules mitotiques ont été évaluées pour l'incidence des aberrations chromosomiques dans le test définitif.

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

in vitro mammalian chromosome aberration test

Specific details on test material used for the study:

- Nom de la substance testée: 2,4-Pentanedione
- Etat physique: liquide
- Stabilité dans les conditions de test: stable

Target gene:

Pas applicable

Species / strain / cell type:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Details on mammalian cell type (if applicable):

CHO-K1-BHA (Subclone 1)

Additional strain / cell type characteristics:

not specified

Metabolic activation:

with and without

Metabolic activation system:

Mélange S9

Test concentrations with justification for top dose:

- 0.01-0.03 mg/ml sans le mélange d'activation métabolique S9
- 0.02-0.10 mg/ml avec le mélange d'activation métabolique S9

Vehicle / solvent:

Eau

Untreated negative controls:

not specified

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

cyclophosphamide

Remarks:

Avec systéme d'activation métabolique (S9)

Untreated negative controls:

not specified

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

no

Positive controls:

yes

Positive control substance:

triethylenemelamine

Remarks:

Sans système d'activation métabolique (S9)

Details on test system and experimental conditions:

Mode d'application: en milieu;

Durée:
- Durée d'exposition: 6 à 10 heures sans activation métabolique, 2 heures avec activation métabolique

Inhibiteur spindle (dosages cytogénétiques): Colchicine
Colorant (pour les dosages cytogénétiques): Giemsa

Nombre de réplications: 2

Nombre de cellules évaluées: 50 cellules/culture/échantillon

Détermination de la cytotoxicité: index mitotique, efficacité de clônage, croissance totale relative

Rationale for test conditions:

Non communiqué

Evaluation criteria:

Un résultat de test positif a été interprété par l'obtention de différences du témoin au niveau de p <0.05 au moins sur la concentration du test, avec indication d'un effet lié à la concentration des expositions ou de la reproductibilité entre les cultures dupliquées.

Statistics:

Les analyses des données d'essai ont utilisé le test exact Fisher'r (unilatéral) pour déterminer la signification statistique des différences entre les populations testées et témoins.
Ce test statistique a été considéré comme approprié pour l'analyse des données car il s'agit d'un test indépendant de la distribution et les données cytogénétiques varient souvent d'une distribution normale requise pour les analyses paramétriques. Les niveaux de différences statistiques sont indiqués par les lettres: a = 0.05> p> 0.01; b = 0.01> p> 0.,001; c = p <0.001.

Species / strain:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Metabolic activation:

with and without

Genotoxicity:

ambiguous

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

not specified

Positive controls validity:

valid

Remarks on result:

other: Tous les types cellulaires testés

Conclusions:

Interprétation des résultats: ambigu

La 2,4-pentanedione ne peut pas être définitivement classée en ce qui concerne la clastogénicité potentielle dans les test avec ou sans activation métabolique.

Executive summary:

La 2,4-pentanedione a été évaluée quant à son activité génotoxique potentielle en utilisant le système de test d'aberration chromosomique in vitro avec des cellules ovariennes de hamster chinois (CHO) avec et sans activation métabolique. Les concentrations de 2,4-pentanedione testées n'ont pas induit de cytotoxicité excessive ni d'inhibition des cellules CHO mitotiques (CHO-K1-BH4 (sous-clone D1)). Un contrôle négatif simultané (milieu de culture), un contrôle positif (15 μg de cyclophosphamide/ml avec activateur métabolique: mélange S9 et 1.5 μg de triéthylènamine/ml sans S9) et des contrôles de véhicule (eau de solvant) ont été testés. Pour l'activation métabolique, un homogénat de foie S9 a été utilisé, préparé à partir de rats mâles Sprague-Dawley induits par Aroclor 1254. La période de traitement était de 2 heures (cellules récoltées à 6 ou 10 heures après le début de l'exposition) avec et 6 ou 10 heures sans activation métabolique. Les chromosomes ont été préparés par des méthodes standard. Lorsque cela était possible, un total de 50 cellules/culture/intervalle de récolte a été examiné pour l'altération chromosomique en utilisant des cultures en duplicat pour la substance testöe et les contrôles. Au moins 5 doses ont été testées avec et sans activation métabolique. L'incidence des dommages chromosomiques a été déterminée pour les 3 doses les plus élevées qui n'ont pas produit d'inhibition cytotoxique excessive de la division cellulaire (mitose). Le nombre d'aberrations de type chromatide et chromosomique, le nombre total d'aberrations pour 50 cellules examinées (avec et sans inclusion de lacunes dans le total) et le niveau de signification statistique ont été déterminés.

Une augmentation significative mais faible des aberrations (bris de chromatides simples prédominants) a été observées seulement à une dosedans les deux tests effectués avec et sans activation métabolique. En plus de ce manque de reproductibilité des effets positifs (test positif), aucune augmentation liée à la dose des aberrations n'a été observée dans la gamme des doses évaluées dans cette expérience. En raison des incohérences dans les données déterminées et de la nature simple des lésions observées, la substance d'essai n'a pas pu être définitivement classée en ce qui concerne la clastogénicité potentielle dans les tests avec ou sans activation. Un test supplémentaire à intervalles d'échantillonnage optimisés a donc été réalisé pour clarifier le potentiel clastogène de la 2,4-pentanedione.

Reference 6

Endpoint:

in vitro cytogenicity / chromosome aberration study in mammalian cells

Type of information:

experimental study

Adequacy of study:

key study

Study period:

Jusqu'à 2000

Reliability:

2 (reliable with restrictions)

Rationale for reliability incl. deficiencies:

study well documented, meets generally accepted scientific principles, acceptable for assessment

Qualifier:

equivalent or similar to guideline

Guideline:

OECD Guideline 473 (In Vitro Mammalian Chromosome Aberration Test)

Deviations:

no

Principles of method if other than guideline:

Étude d'aberration chromosomique (AC); Les concentrations de la substance testée utilisées dans l'essai n'ont pas produit une inhibition cytotoxique excessive des cellules mitotiques dérivée des études préliminaires. Les trois doses les plus élevées ont été sélectionnées pour la détermination de l'incidence des aberrations chromosomiques. Les chromosomes ont été préparés par des méthodes standard et colorés en utilisant la technique de fluorescence plus Giemsa (FPG) qui est utilisée pour la visualisation des échanges de chromatides sœurs. Les cellules CHO ont été exposées à TS et à des témoins appropriés pendant une période de 6 heures en l'absence d'activation métabolique. Le potentiel génotoxique indirect, nécessitant une activation métabolique par l'homogénat S9 du foie, a été étudié avec une période d'exposition de 2 heures au système d'activation TS et S9. Après la période d'exposition, les cellules ont été rincées, du milieu frais a été ajouté et les cellules ont ensuite été prélevées 14 ou 22 heures après le début de l'exposition pour un test effectué avec ou sans activation. Le cyclophosphamide et la triéthylmélamine ont été utilisés comme agents de contrôle positif pour garantir la fiabilité et la sensibilité du système de test pour détecter les clastogènes dépendants de l'activation métabolique et indépendants.

GLP compliance:

not specified

Type of assay:

in vitro mammalian chromosome aberration test

Specific details on test material used for the study:

- Nom de la substance testée: 2,4-Pentanedione
- Etat physique: liquide
- Stabilité dans les conditions de test: stable

Target gene:

Pas applicable

Species / strain / cell type:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Details on mammalian cell type (if applicable):

CHO-K1-BHA (Subclone 1)

Additional strain / cell type characteristics:

not applicable

Metabolic activation:

with and without

Metabolic activation system:

Mélange S9

Test concentrations with justification for top dose:

- 0.04-0.12 mg/ml sans le mélange d'activation métabolique S9
- 0.06-0.14 mg/ml avec le mélange d'activation métabolique S9

Vehicle / solvent:

Eau

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

not specified

Positive controls:

yes

Positive control substance:

cyclophosphamide

Remarks:

Avec systéme d'activation métabolique (S9)

Untreated negative controls:

yes

Negative solvent / vehicle controls:

yes

True negative controls:

not specified

Positive controls:

yes

Positive control substance:

triethylenemelamine

Remarks:

Sans système d'activation métabolique (S9)

Details on test system and experimental conditions:

Mode d'application: en milieu;

Durée:
- Durée d'exposition: 6 heures sans activation métabolique, 2 heures avec activation métabolique
- Temps d'expression (cellules dans le milieu de croissance): 14/22 h

Remarque: Les cellules ont été cultivées pendant 10 heures supplémentaires après le temps de division normal de 12 heures (la substance testée a produit un retard significatif dans le cycle de division cellulaire), donnant ainsi aux cellules une période de 22 heures pour récupérer et compléter la synthèse d'ADN. Cette période de croissance prolongée a permis d'évaluer des doses plus élevées et a donné aux cellules suffisamment de temps pour répliquer l'ADN, ce qui est nécessaire pour l'observation des types de dommages chromosomiques dépendants de la synthèse. Prolonger la période d'échantillonnage chromosomique pour compenser les retards du cycle cellulaire a augmenté la sensibilité du système de test et a démontré sans équivoque que la substance testée produisait des abbérations chromosomiques lors du test de potentiel clastogène direct dans les cellules CHO.

Inhibiteur spindle (dosages cytogénétiques): Colchicine
Colorant (pour les dosages cytogénétiques): Fluorescence plus Giemsa (FPG)

Nombre de réplications: 2

Nombre de cellules évaluées: 50

Détermination de la cytotoxicité: index mitotique

Rationale for test conditions:

Non communiqué

Evaluation criteria:

Un résultat de test a été considéré comme positif si au moins une concentration testée a produit une augmentation statistiquement significative des aberrations chromosomiques avec une augmentation de la concentration de la substance testée.

Statistics:

Test exact de Fisher (one tailed)

Species / strain:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Metabolic activation:

without

Genotoxicity:

positive

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

valid

Positive controls validity:

valid

Species / strain:

Chinese hamster Ovary (CHO)

Metabolic activation:

with

Genotoxicity:

negative

Cytotoxicity / choice of top concentrations:

cytotoxicity

Vehicle controls validity:

valid

Untreated negative controls validity:

valid

Positive controls validity:

valid

Additional information on results:

Facteurs confondants spécifiques au test:
- Effets du pH: non rapporté
- Effets de l'osmolalité: non rapporté
- Évaporation du milieu: non rapporté
- Solubilité dans l'eau: soluble
- Précipitation: non rapporté
- Autres effets confondants: non signalés

Comparaison avec les données de contrôles historiques: en ligne avec les données de contrôle historiques

Conclusions:

Interprétation des résultats: test négatif avec activation métabolique; test positif sans activation métabolique

Dans les tests effectués sans l'activation métabolique (sans mélange S9), les trois niveaux de dose de la substance testée ont produit des augmentations significatives du nombre d'abbérations chromosomiques.
En revanche, les cellules testées dans des conditions physiologiques plus réalistes (à savoir en présence d'un système d'acitvation métabolique: mélange S9) n'ont pas montré d'augmentation du nombre d'abbérations chromosomiques par rapport aux valeurs des cultures témoins.
La substance testée est considérée comme hautement clastogène (rupture des chromosomes) pour les cellules CHO dans des tests réalisés sans activation métabolique mais elle n'est pas apparue comme ayant des effets clastogènes lorsqu'elle a été testée en présence d'une activation métabolique dans les conditions de ce système de test in vitro. La 2,4-pentanedioen possède un potentiel clastogène direct dans les conditions de ce système de test in vitro.

Executive summary:

Dans cette étude, le potentiel clastogène de la 2,4-pentanedione a été évalué en utilisant des intervalles d'échantillonnage déterminés à partir d'essais préliminaires pour définir les retards du cycle cellulaire. Des tests préliminaires effectués en l'absence d'activation métabolique (S9), en utilisant une période de traitement de 6 heures, ont indiqué que la 2,4-pentanedione induisait un retard significatif dans le cycle de la division cellulaire. Dans les essais sans activateur métabolique (S9), les cellules ont été traitées pendant 6 heures et ont été échantillonnées pour les chromosomes 22 heures après le début du traitement. Dans les tests effectués avec l'activation métabolique, les cellules ont été traitées pendant 2 heures et les chromosomes ont été échantillonnés 14 heures après le début du traitement.

Les concentrations d'essai ont été choisies sur la base des données de cytotoxicité observées dans les expériences précédentes avec des cellules CHO et sur des données de cytotoxicité supplémentaires acquises dans le test préliminaire pour des temps d'échantillonnage optimaux. Les concentrations testées de 2,4-pentanedione se situaient entre 0.04 et 0.12 mg/ml sans mélange S9 et entre 0.06 et 0.14 mg/ml avec le mélange (S9). Les trois doses les plus élevées qui n'ont pas produit d'inhibition cytotoxique excessive des cellules mitotiques ont été utilisées pour évaluer l'incidence des aberrations chromosomiques.

Dans les tests effectués sans activation, les trois doses de 2,4-pentanedione testées ont induit des augmentations significatives du nombre d'aberrations chromosomiques. La proportion de cellules présentant des aberrations chromosomiques variait de 95 à 100%, ce qui était hautement statistiquement significatif par rapport à une incidence de 3% de cellules aberrantes chez les témoins négatifs. En outre, une grande proportion de cellules gravement endommagées, constituées de multiples ruptures et de réarrangements complexes, ont été observées aux trois niveaux de dose.

En revanche, les cellules testées en présence du système d'activation métabolique S9 n'ont pas montré d'augmentation du nombre d'aberrations chromosomiques par rapport aux valeurs des cultures témoins. Les cassures et les fragments de chromatides simples étaient les types prédominants d'aberrations observées. Cependant, les fréquences de ces aberrations se situaient dans la gamme d'incidence spontanée de ce système de test au laboratoire.

La 2,4-pentanedione est considéré comme hautement clastogène (rupture des chromosomes) pour les cellules de l'ovaire de Hamster chinois dans le test effectué sans activation mais elle n'apparait pas comme ayant des effets clastogènes quand elle est testée en présence d'un activateur métabolique dans les conditions de ce système de test in vitro.

Endpoint conclusion

Endpoint conclusion:

no adverse effect observed (negative)

Genetic toxicity in vivo

Description of key information

Pas applicable

Endpoint conclusion

Endpoint conclusion:

no study available

Mode of Action Analysis / Human Relevance Framework

Pas applicable

Justification for classification or non-classification

Sur la base de l'évaluation susmentionnée du potentiel génotoxique in vitro de la substance à enregistrer, la substance à enregistrer (Acétylacétonate de Vanadyle) n'est pas classifiée comme génotoxique/mutagène sur les cellules germinales,conformément au CLP (règlement (CE) n ° 1272/2008 du Parlement européen et du Conseil) en tant que mise en œuvre du système UN-GHS dans l'Union Européenne.